方法驗(yàn)證是指實(shí)驗(yàn)室通過(guò)核查，提供客觀有效證據(jù)證明自身滿足檢測(cè)方法規(guī)定要求的過(guò)程，即證實(shí)該方法能在該實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的設(shè)施設(shè)備、人員、環(huán)境等條件下獲得令人滿意的結(jié)果，適用于實(shí)驗(yàn)室新引入的標(biāo)準(zhǔn)方法。

方法驗(yàn)證過(guò)程中關(guān)鍵的參數(shù)取決于方法的特性和可能測(cè)到的樣品基質(zhì)的檢測(cè)范圍，至少應(yīng)測(cè)定準(zhǔn)確度和精密度。對(duì)于痕量化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室還應(yīng)確保獲得適當(dāng)?shù)臋z出限(LOD)和定量限(LQD)。通常情況下定量分析方法驗(yàn)證的參數(shù)包括但不限于檢出限、定量限、選擇性、線性范圍、精密度（重復(fù)性和再現(xiàn)性）、準(zhǔn)確度。

一、檢出限

用特定分析方法在給定的置信度內(nèi)可從樣品中定性檢出待測(cè)物質(zhì)的最低濃度或最小量即為方法的檢出限。方法檢出限的計(jì)算和表達(dá)方法有很多，常見(jiàn)的包括空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法、信噪比法、逐步稀釋法等。同一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)不同的檢出限表達(dá)結(jié)果差異可能會(huì)達(dá)到幾個(gè)數(shù)量級(jí)。實(shí)驗(yàn)室在選擇檢出限的表示方法時(shí)，應(yīng)盡可能的研究多種表示方法，對(duì)比結(jié)果，選擇最佳的方法來(lái)表示該方法的檢出限。如果檢測(cè)方法中已給方法檢出限，則在給出的方法檢出限濃度水平上，通過(guò)分析該濃度水平的樣品，用以驗(yàn)證給出方法檢出限，分析結(jié)果應(yīng)在給出的方法檢出限±20%范圍內(nèi)；若方法未給出檢出限，實(shí)驗(yàn)室則應(yīng)選擇一個(gè)適當(dāng)?shù)姆椒ㄑ芯考坝?jì)算表示。下面詳細(xì)闡述各種方法檢出限的計(jì)算表達(dá)方式。

1、空白標(biāo)準(zhǔn)偏差法（適用于光譜法檢測(cè)）

按照樣品分析的全部步驟，重復(fù)n（n≥7）次空白試驗(yàn)，將多次測(cè)定結(jié)果換算為樣品中的濃度或含量，計(jì)算n次平行測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差，按公式計(jì)算方法檢出限。

MDL= t (n 1,0.99)×S

MDL——方法檢出限；

n——樣品平行測(cè)定的次數(shù)；

t——自由度為n-1，置信度為99%時(shí)的t分布（單側(cè)）；

S——n次平行測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差

其中，當(dāng)自由度為n -1，置信度為99% 時(shí)的t 值可參考表取值。

2、信噪比法（適用于色譜法檢測(cè)）

對(duì)空白樣品加入一定濃度（一般為估計(jì)的方法檢出限）的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按照樣品分析的全部步驟進(jìn)行試驗(yàn)，計(jì)算儀器上待測(cè)物與噪聲的信號(hào)比值，若信噪比S/N＞3時(shí)，則進(jìn)一步減少加標(biāo)濃度，反之則增加加標(biāo)濃度重新進(jìn)行試驗(yàn)。當(dāng)信噪比S/N＝3時(shí)，則對(duì)應(yīng)的樣品濃度為該方法的檢出限，按公式計(jì)算方法檢出限。

MDL=S/b

S——儀器噪音的3倍，即儀器能辨認(rèn)的最小的物質(zhì)信號(hào)；

b——校準(zhǔn)曲線回歸方程中的斜率；

3、最小液滴體積法（適用于滴定法檢測(cè)）

一般根據(jù)所用的滴定管產(chǎn)生的最小液滴的體積來(lái)計(jì)算，按公式計(jì)算方法檢出限。

MDL= kλρV0M1/ M0V1

λ——被測(cè)組分與滴定液的摩爾比；

ρ——滴定液的質(zhì)量濃度，g/ml；

V0——滴定管所產(chǎn)生的最小液滴體積，ml；

M0——滴定液的摩爾質(zhì)量，g/mol；

V1——被測(cè)組分的取樣體積，ml；

M1——被測(cè)項(xiàng)目的摩爾質(zhì)量，g/mol；

k——當(dāng)為一次滴定時(shí)，k＝1；當(dāng)為反滴定或間接滴定時(shí)，k＝2。

二、定量限

在限定誤差能滿足預(yù)定要求的前提下，用特定方法能夠準(zhǔn)確定量測(cè)定待測(cè)物質(zhì)的最低濃度或最小量即為方法的定量限。一般取3~4倍的方法檢出限作為方法的定量限。

三、選擇性

選擇性是指用某種分析方法測(cè)定某組分時(shí)，能夠避免樣品中其他共存組分干擾的能力。如果方法已提供了干擾情況的所有信息，則實(shí)驗(yàn)室無(wú)需對(duì)干擾情況采取進(jìn)一步的研究。如果方法未提供干擾情況的信息或信息不完整，則須對(duì)可能存在的干擾情況進(jìn)行研究。

對(duì)于化學(xué)分析方法，在有干擾的情況下，如：基質(zhì)成分、代謝物、降解產(chǎn)物、內(nèi)源性物質(zhì)等，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要，實(shí)驗(yàn)室可使用但不限于下述兩種方法檢查干擾：

方法1：分析一定數(shù)量的代表性空白樣品，檢查在目標(biāo)分析物出現(xiàn)的區(qū)域是否有干擾（信號(hào)、峰等）；

方法2：在代表性空白樣品中添加一定濃度的有可能干擾分析物定性和/或定量的物質(zhì)。

四、線性范圍

對(duì)于分析方法而言，用線性計(jì)算模型來(lái)定義儀器響應(yīng)與濃度的關(guān)系，該計(jì)算模型的應(yīng)用范圍即為線性范圍。在對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行線性及校準(zhǔn)驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)文件規(guī)定的各個(gè)濃度點(diǎn)配制校準(zhǔn)曲線，以驗(yàn)證儀器的測(cè)定上限及下限是否能滿足標(biāo)準(zhǔn)文件所規(guī)定的線性范圍，以及由此得到的相關(guān)系數(shù)r是否滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。

五、精密度

在規(guī)定條件下，多次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果間的一致程度即為精密度。精密度包括重復(fù)性和再現(xiàn)性，一般采取有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)室指定某一名檢測(cè)人員對(duì)高、中、低三種不同含量水平（高、中、低三種含量水平建議依次為10倍定量限、2倍定量限、定量限）的同一樣品，按樣品處理程序每個(gè)樣品平行測(cè)定6次，分別計(jì)算不同濃度或含量樣品的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差等各項(xiàng)參數(shù)，計(jì)算結(jié)果應(yīng)小于或等于標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的重復(fù)性限r(nóng)。

六、準(zhǔn)確度

檢測(cè)結(jié)果與樣品真值間的一致程度即為準(zhǔn)確度，一般采用測(cè)定有證標(biāo)準(zhǔn)樣品或加標(biāo)回收試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)估驗(yàn)證。若實(shí)驗(yàn)室使用有證標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行準(zhǔn)確度驗(yàn)證，則需對(duì)對(duì)3個(gè)不同含量水平（含量水平的選擇見(jiàn)“五、精密度”）的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品按全程序平行測(cè)定6 次，分別計(jì)算不同濃度或含量水平有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品的平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)誤差等各項(xiàng)參數(shù)。若實(shí)驗(yàn)室對(duì)實(shí)際樣品進(jìn)行加標(biāo)試驗(yàn)進(jìn)行準(zhǔn)確度驗(yàn)證，則需對(duì)每個(gè)樣品類型的不同含量水平的統(tǒng)一樣品中分別加入一定量的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)加標(biāo)樣品按全程序平行測(cè)定6次，分別計(jì)算每個(gè)統(tǒng)一樣品的加標(biāo)回收率。